| Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 366-2 | ||||
Resumo:Um dos parâmetros microbiológicos importantes no padrão de potabilidade é a ausência de contaminação por bactérias do grupo coliforme, que assume relevância como indicador da existência de microrganismos responsáveis pela transmissão de doenças de veiculação hídrica. O grupo coliforme é um subgrupo da família Enterobacteriaceae dividido em coliformes totais e termotolerantes. A Escherichia coli pertence à família Enterobacteriaceae e é tradicionalmente usada para monitorar a qualidade microbiológica da água, pois a água destinada ao consumo humano não deve conter microrganismos indicadores de contaminação fecal. Este estudo foi realizado como um piloto para avaliar o nível de contaminação da cepa de Escherichia coli (ATCC 25922) em água visando a melhoria do tempo gasto na determinação de células viáveis através de um método alternativo, mais rápido e prático como a Espectroscopia de Impedância Elétrica (EIS). Para a quantificação de células viáveis de Escherichia coli em amostras de água de abastecimento foi realizada a contagem padrão em placas. As amostras de água de abastecimento foram coletadas da torneira do laboratório de alimentos da UFJFGV e esterilizadas em autoclave por 121ºC a 15 minutos. A cepa padrão foi cultivada em caldo Mueller Hinton por 24 h a temperatura de 37°C até obtenção de 109 UFC/mL. Após, as águas da torneira previamente esterilizadas foram contaminadas com a cepa padrão, e realizadas diluições seriadas. O meio de cultivo utilizado foi o ágar Ágar EMB e a inoculação realizada em duplicata por plaqueamento em superfície. As placas foram incubadas a 37 ºC por 24 h, após o período de incubação, foi realizada a contagem das colônias. As medidas de impedância elétrica foram realizadas na água contaminada experimentalmente logo após a realização da diluição seriada até 10-6 em um analisador HIOKI, modelo 3170, estimulado por um campo elétrico externo alternado, do tipo onda senoidal (AC), com 1 V pico a pico, em uma faixa de frequência de 10 Hz a 5 MHz. Um eletrodo de placa paralela de platina (constante geométrica K = 1 cm-1) foi acoplado ao instrumento para medições nas águas. As grandezas medidas foram: módulos de impedância e admitância, e partes real e imaginária da impedância. Os espectros foram gerados a partir do Software de Análise de Dados e Gráficos OriginPro 9.0.0 (64 bits) SR2 b87.
O resultado da contagem padrão em placas na diluição 10-6 foi 9,9x108 UFC/mL, permitindo a confirmação da contaminação experimental realizada. A análise dos dados obtidos para a contagem padrão em placas, mostrou correspondência com a tendência dos espectros obtidos pela técnica de EIS. Observou-se que os espectros do módulo da impedância elétrica, assim como de grandezas derivadas como a parte real (Re[Z*], imaginária (Im[Z*] e a admitância apresentaram tendências de variação do valor de seus platôs, coerentes com as concentrações de microrganismos presentes, controladas pelas diluições realizadas. Entretanto, admite-se que este trabalho necessita da realização de uma maior série temporal de análises para que a predição seja realizada por um período mais longo para melhor definição dos parâmetros de análise.
Palavras-chave: coliformes, qualidade microbiológica da água, Espectroscopia de Impedância Elétrica, contagem padrão em placas | |||||